PCR ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಹಲವಾರು ಕಿಣ್ವಗಳು

ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್, ಎಂದು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆಪಿಸಿಆರ್ಇಂಗ್ಲಿಷ್‌ನಲ್ಲಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ DNA ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಬಳಸುವ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ.ಇದನ್ನು ದೇಹದ ಹೊರಗಿನ ವಿಶೇಷ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಬಹುದು, ಇದು ಡಿಎನ್‌ಎಯ ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ.ಸಂಪೂರ್ಣ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿಪಿಸಿಆರ್ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಒಂದು ವರ್ಗದ ವಸ್ತುಗಳು ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತವೆ - ಕಿಣ್ವಗಳು.

1. ಟಕ್ ಡಿಎನ್ಎ

ನ ಆರಂಭಿಕ ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿಪಿಸಿಆರ್, ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು Escherichia coli DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ I ಅನ್ನು ಬಳಸಿದರು, ಆದರೆ ಈ ಕಿಣ್ವದಲ್ಲಿ ಸಮಸ್ಯೆ ಇದೆ: ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ ಚಕ್ರವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿದಾಗ ಹೊಸ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಪುನಃ ತುಂಬಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ, ಇದು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಹಂತಗಳನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಸಂಕೀರ್ಣಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಿ ವರ್ಧಿಸಲು ಕಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ.1988 ರಲ್ಲಿ ಥರ್ಮಸ್ ಅಕ್ವಾಟಿಕಸ್‌ನಿಂದ ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು ಆಕಸ್ಮಿಕವಾಗಿ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದ ನಂತರ ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಲಾಯಿತು. ಅಂದಿನಿಂದ, DNA ಯ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ವರ್ಧನೆಯು ವಾಸ್ತವವಾಗಿದೆ.ಈ ಕಿಣ್ವದ ಆವಿಷ್ಕಾರವೂ ಮಾಡುತ್ತದೆಪಿಸಿಆರ್ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವು ಅನುಕೂಲಕರ, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮತ್ತು ಸಾರ್ವತ್ರಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ.ಪ್ರಸ್ತುತ, ಡಿಎನ್‌ಎ ಕಿಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಗಿದೆ.

2. PfuDNA

ಮೇಲೆ ತಿಳಿಸಿದಂತೆ, Taq DNase ಒಂದು ದೊಡ್ಡ ದೋಷವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದ ಕಾರಣ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಮಟ್ಟಿಗೆ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ್ದಾರೆ, ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ನಿಖರವಾದ ಪರೀಕ್ಷಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ.ಆದರೆ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ಮಾರ್ಪಾಡು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ.PfuDNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ಮೇಲಿನ ಅನಾನುಕೂಲಗಳನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸಬಹುದು, ಇದರಿಂದಾಗಿ PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ನಡೆಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಗುರಿ ಜೀನ್ ವರ್ಧನೆಯ ಯಶಸ್ಸಿನ ದರವನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು.

3. ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್

ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಅನ್ನು 1970 ರಲ್ಲಿ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು. ಈ ಕಿಣ್ವವು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನಂತೆ, ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಯನ್ನು ತಲಾಧಾರವಾಗಿ ಬಳಸುತ್ತದೆ, ಬೇಸ್ ಪೇರಿಂಗ್ ತತ್ವವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 5′-3′ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗೆ ಪೂರಕವಾದ ಡಿಎನ್‌ಎ ಸಿಂಗಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ.ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಿಂದ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಯಾವುದೇ 3′-5′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ.ಆದಾಗ್ಯೂ, ಇದು RNase H ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇದು ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್‌ನ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಉದ್ದವನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಮಟ್ಟಿಗೆ ಮಿತಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ವೈಲ್ಡ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್‌ನ ಕಡಿಮೆ ನಿಷ್ಠೆ ಮತ್ತು ಥರ್ಮೋಸ್ಟೆಬಿಲಿಟಿ ಕಾರಣ, ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು ಅದನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದರು.

ಫಾರ್ಪಿಸಿಆರ್ಪ್ರಯೋಗಗಳು, ಮುಖ್ಯ ಉಪಭೋಗ್ಯಗಳೆಂದರೆ: ಪ್ರತ್ಯೇಕ PCR ಟ್ಯೂಬ್, 4/8-ಸ್ಟ್ರಿಪ್ PCR ಟ್ಯೂಬ್, PCR ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು.

ಲ್ಯಾಬಿಯೊ ಅವರPCR ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳುಕೆಳಗಿನವುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆಅನುಕೂಲಗಳು:

ಪಿಸಿಆರ್ ಫಲಕಗಳು: ವಿಶಾಲ ಥರ್ಮಲ್ ಸೈಕ್ಲರ್ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ;ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಂಟ್ರಾಸ್ಟ್, ಸುಲಭವಾದ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ;ಚೆನ್ನಾಗಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರತಿಫಲನ;ಒಳ್ಳೆಯದುಶಾಖ ವರ್ಗಾವಣೆ;ಪ್ರಮಾಣೀಕೃತ DNase, RNase, DNA, PCR ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪೈರೋಜನ್-ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ.

ವೈಯಕ್ತಿಕ PCR ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು: ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆ-ನಿರೋಧಕ; ಒಳ್ಳೆಯದುಶಾಖ ವರ್ಗಾವಣೆ;ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸ್ಪಷ್ಟತೆ; ಪ್ರಮಾಣೀಕೃತ DNase, RNase, DNA, PCR ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳು, ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ಪೈರೋಜೆನ್-ಮುಕ್ತ.

4/8-ಸ್ಟ್ರಿಪ್ಸ್ PCR ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು: ಅಲ್ಟ್ರಾ-ತೆಳುವಾದ ಗೋಡೆಗಳು; ಹೆಚ್ಚಿನ ಸ್ಪಷ್ಟತೆ; ಉತ್ತಮ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರತಿಫಲನ;ಔಷಧೀಯ ಉದ್ಯಮ, ಆಹಾರ ಉದ್ಯಮ, ಮತ್ತು ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು;ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ, ವರ್ಜಿನ್ PP ವಸ್ತು; ಪ್ರಮಾಣೀಕೃತ DNase, RNase, DNA, PCR ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳು, ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ಪೈರೋಜೆನ್-ಮುಕ್ತ.