ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ನ ಬಳಕೆ ಮತ್ತು ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು
1) ಸೂಕ್ತವಾದ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಆರಿಸಿ.UF ಪೊರೆಗಳು ವಿವಿಧ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳಿಗೆ ಸಹಿಷ್ಣುತೆಯ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಭಿನ್ನವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ.ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿ, 10 kDa ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ ಕಟ್-ಆಫ್ ಹೊಂದಿರುವ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ ಕಟ್-ಆಫ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಅದು 35 kDa ನಂತಹ ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ 1/3 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರಬಾರದು.ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕವು ಸುಮಾರು 10 kd ಆಗಿದ್ದರೆ, 3 KD ಯ ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ ಕಟ್-ಆಫ್ ಹೊಂದಿರುವ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.
(2) ಹೊಸದಾಗಿ ಖರೀದಿಸಿದ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಶುಷ್ಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಅಲ್ಟ್ರಾಪ್ಯೂರ್ ನೀರನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನೀರನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಪೊರೆಯ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ, ಐಸ್ ಬಾತ್ ಅಥವಾ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ ಅನ್ನು ಕೆಲವು ನಿಮಿಷಗಳವರೆಗೆ ತಂಪಾಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ನಂತರ ನೀರನ್ನು ಸುರಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಂದರೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರವ, ಮತ್ತು ಎಷ್ಟು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಯಾವುದು ಟ್ಯೂಬ್ನ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿರುವ ಬಿಳಿ ರೇಖೆಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿಲ್ಲ.ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯು ಹಗುರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೊದಲು ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಐಸ್ನಲ್ಲಿ ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ತಂಪಾಗಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.
3) ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ಮತ್ತು ಗುರುತ್ವಾಕರ್ಷಣೆಯ ಕೇಂದ್ರ ಎರಡೂ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ತಲುಪಬೇಕಿತ್ತು.ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ವೇಗ ಮತ್ತು ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ತುಂಬಾ ವೇಗವಾಗಿಲ್ಲ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ನೇರವಾಗಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಹಾನಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲಾಯಿತು (ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ 4 ಡಿಗ್ರಿಗಳಿಗೆ ಪೂರ್ವ ತಂಪಾಗಿರುತ್ತದೆ).ವಿಭಿನ್ನ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗಳ RPM ಅನ್ನು g ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸಿದ ನಂತರ, ಅದು ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿತ್ತು.ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ನ ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ಕನಿಷ್ಟ ಮಟ್ಟಕ್ಕೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ, ಪೊರೆಯ ಮೇಲಿನ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಗಮನಿಸಿ, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ತನ್ನ ಗಮ್ಯಸ್ಥಾನದ ವೇಗವನ್ನು ತಲುಪಿದ ನಂತರ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಯನ್ನು ಬಿಡಲು ಮರೆಯದಿರಿ ಅಥವಾ ನಿಮಗೆ ಸಮಸ್ಯೆಯಿದ್ದರೆ, ನೀವು ಅದನ್ನು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ನಿಭಾಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.ಸ್ಪಿಂಡಲ್‌ಗೆ ಪೊರೆಯ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ (ಕೋನೀಯ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಪ್ರಕರಣವು ಪೊರೆಯಿಂದ ಅಕ್ಷಕ್ಕೆ ಲಂಬವಾಗಿರುತ್ತದೆ).ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಬಳಕೆಯಲ್ಲಿ, ಸಾಮಾನ್ಯ ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ವೇಗವು ಸೂಚನೆಗಳಲ್ಲಿರುವುದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್ನ ಜೀವನವನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು.
3) ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ಮತ್ತು ಗುರುತ್ವಾಕರ್ಷಣೆಯ ಕೇಂದ್ರ ಎರಡೂ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ತಲುಪಬೇಕಿತ್ತು.ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ವೇಗ ಮತ್ತು ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ತುಂಬಾ ವೇಗವಾಗಿಲ್ಲ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ನೇರವಾಗಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಹಾನಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲಾಯಿತು (ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ 4 ಡಿಗ್ರಿಗಳಿಗೆ ಪೂರ್ವ ತಂಪಾಗಿರುತ್ತದೆ).ವಿಭಿನ್ನ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗಳ RPM ಅನ್ನು g ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸಿದ ನಂತರ, ಅದು ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿತ್ತು.ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ನ ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ಕನಿಷ್ಟ ಮಟ್ಟಕ್ಕೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ, ಪೊರೆಯ ಮೇಲಿನ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಗಮನಿಸಿ, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ತನ್ನ ಗಮ್ಯಸ್ಥಾನದ ವೇಗವನ್ನು ತಲುಪಿದ ನಂತರ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಯನ್ನು ಬಿಡಲು ಮರೆಯದಿರಿ ಅಥವಾ ನಿಮಗೆ ಸಮಸ್ಯೆಯಿದ್ದರೆ, ನೀವು ಅದನ್ನು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ನಿಭಾಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.ಸ್ಪಿಂಡಲ್‌ಗೆ ಪೊರೆಯ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ (ಕೋನೀಯ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಪ್ರಕರಣವು ಪೊರೆಯಿಂದ ಅಕ್ಷಕ್ಕೆ ಲಂಬವಾಗಿರುತ್ತದೆ).ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಬಳಕೆಯಲ್ಲಿ, ಸಾಮಾನ್ಯ ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ವೇಗವು ಸೂಚನೆಗಳಲ್ಲಿರುವುದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್ನ ಜೀವನವನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು.
(4) ಉಳಿದ 1ml ಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದಾಗ, 50ul ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, 10ul ಹರಿವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಯಾವುದೇ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣವಿದೆಯೇ ಎಂದು ನೋಡಿ, ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಾಣೆಯಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ತೀರ್ಪು ನೀಡುತ್ತದೆ.ಟ್ಯೂಬ್ ಸೋರಿಕೆಯಾಗಿದ್ದರೆ, ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಮೇಲಿನ ಪದರವನ್ನು ಮತ್ತೆ ಸುರಿಯಿರಿ ಮತ್ತು ಹೊಸ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಫ್ಲೋಥ್ರೂ ಮಾಡಿ.ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳು ತಪ್ಪಿಹೋಗಿವೆಯೇ ಎಂದು ನಿಖರವಾಗಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ಫ್ಲೋಥ್ರೂಗೆ ಮೊದಲು 5mgml BSA ನೊಂದಿಗೆ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಮಾಡಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಂಟು ಅಥವಾ ಬ್ರಾಡ್‌ಫೋರ್ಡ್ ಕಚ್ಚಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೇಲೆ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉಳಿದಿರುವ ಸಾಂದ್ರೀಕೃತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮುಂದುವರಿಸಿ (ಇದು ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಿಸಿಯಾಗದಂತೆ ತಡೆಯುತ್ತದೆ) ಎಲ್ಲಾ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ.ಟ್ಯೂಬ್ ಮುಚ್ಚುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಮಳೆಯು ಸಂಭವಿಸಿದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕಾಳಜಿ ವಹಿಸಿ.ಮಳೆಯು ಸಂಭವಿಸಿದಲ್ಲಿ, ಮಳೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾರಣವು ಅತಿಯಾದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯೇ ಅಥವಾ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲದ ಬಫರ್ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಿ;ಮೊದಲನೆಯದನ್ನು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಬಹು ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೂಲಕ ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು, ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯದು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಯಾವುದೇ ಮಳೆಯಾಗದವರೆಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಬಫರ್ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ವಿನಿಮಯ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು.
(4) ಉಳಿದ 1ml ಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದಾಗ, 50ul ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, 10ul ಹರಿವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಯಾವುದೇ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣವಿದೆಯೇ ಎಂದು ನೋಡಿ, ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಾಣೆಯಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ತೀರ್ಪು ನೀಡುತ್ತದೆ.ಟ್ಯೂಬ್ ಸೋರಿಕೆಯಾಗಿದ್ದರೆ, ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಮೇಲಿನ ಪದರವನ್ನು ಮತ್ತೆ ಸುರಿಯಿರಿ ಮತ್ತು ಹೊಸ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಫ್ಲೋಥ್ರೂ ಮಾಡಿ.ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳು ತಪ್ಪಿಹೋಗಿವೆಯೇ ಎಂದು ನಿಖರವಾಗಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ಫ್ಲೋಥ್ರೂಗೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ 5mgml BSA ನೊಂದಿಗೆ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಮಾಡಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಂಟು ಅಥವಾ ಬ್ರಾಡ್‌ಫೋರ್ಡ್ ಕಚ್ಚಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೇಲೆ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉಳಿದಿರುವ ಸಾಂದ್ರೀಕೃತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮುಂದುವರಿಸಿ (ಇದು ಐಸ್ನಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಿಸಿಯಾಗದಂತೆ ತಡೆಯುತ್ತದೆ) ಎಲ್ಲಾ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ.ಟ್ಯೂಬ್ ಮುಚ್ಚುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಮಳೆಯು ಸಂಭವಿಸಿದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕಾಳಜಿ ವಹಿಸಿ.ಮಳೆಯು ಸಂಭವಿಸಿದಲ್ಲಿ, ಮಳೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾರಣವು ಅತಿಯಾದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯೇ ಅಥವಾ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲದ ಬಫರ್ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಿ;ಮೊದಲನೆಯದನ್ನು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಬಹು ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೂಲಕ ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು, ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯದು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಯಾವುದೇ ಅವಕ್ಷೇಪನ ಸಂಭವಿಸದವರೆಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಬಫರ್ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ವಿನಿಮಯ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು.
(5) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲು ಮೊದಲ ಕೆಲವು ಹಂತಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕಾದರೆ, ಹೊಸ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಸೇರಿಸಿ (0.22um ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಮೂಲಕ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್) ಒಟ್ಟು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಸುಮಾರು 1ml ಗೆ, ಮತ್ತು ಮೂರಕ್ಕೆ ಸುಮಾರು 1ml ಗೆ ಮರುಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿ. ಸತತ ಬಾರಿ, ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಅಂತಿಮ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ಅಂತಿಮ ಪರಿಮಾಣದೊಂದಿಗೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 500ul ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿಲ್ಲ, ಆದರೆ 200ul ಒಳಗೆ.ಮೂರು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ 1000 × ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನದನ್ನು ಸಾಧಿಸಿ, ಮೂಲಭೂತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಬಫರ್ ಬದಲಾವಣೆ, ಕನಿಷ್ಠ 10 × ಅಥವಾ ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ ವಾಲ್ಯೂಮ್ ಎನ್ರಿಚ್ಮೆಂಟ್ ಮೂಲಕ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.
(5) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲು ಮೊದಲ ಕೆಲವು ಹಂತಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕಾದರೆ, ಹೊಸ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಸೇರಿಸಿ (0.22um ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಮೂಲಕ ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್) ಒಟ್ಟು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಸುಮಾರು 1ml ಗೆ, ಮತ್ತು ಮೂರಕ್ಕೆ ಸುಮಾರು 1ml ಗೆ ಮರುಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿ. ಸತತ ಬಾರಿ, ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಅಂತಿಮ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ಅಂತಿಮ ಪರಿಮಾಣದೊಂದಿಗೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 500ul ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿಲ್ಲ, ಆದರೆ 200ul ಒಳಗೆ.ಮೂರು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ 1000 × ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನದನ್ನು ಸಾಧಿಸಿ, ಮೂಲಭೂತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಬಫರ್ ಬದಲಾವಣೆ, ಕನಿಷ್ಠ 10 × ಅಥವಾ ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ ವಾಲ್ಯೂಮ್ ಎನ್ರಿಚ್ಮೆಂಟ್ ಮೂಲಕ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ನವೆಂಬರ್-09-2022